Molekulare Neurobiologie

Synapsenstabilisierung in vivo

In Nagetiermodellen untersuchen wir die Funktion von Proteinen für die synaptische Stabilisierung. Der Ensatz von viralen Vektoren ermöglicht die Analyse von einzelnen genetisch veränderten Zellen in einer Wildtyp-Umgebung. Ferner kann das Zusammenspiel unterschiedlicher Gehirnregionen untersucht werden, weil der lentivirale Ansatz die genetische Manipulation auf definierte Regionen im Gehirn erlaubt. Schließlich kann der Zeitpunkt der Intervention in der Entwicklung eines Tieres frei gewählt werden. Der Einfluß von Genen auf die synaptische Stabilisierung wird unabhängig von Entwicklungsvorgängen beobachtet.

Wir setzen lentivirale Vektoren ein, die die Expression von Zielproteinen durch shRNA oder miRNA inhibieren und gleichzeitig fluoreszente Markerproteine exprimieren, um erfolgreich infizierte Zellen zu identifizieren. Zellspezifische Promotoren stehen zur Verfügung. Mit konfokaler Mikroskopie in Verbindung mit Imagingprozeduren können infizierte Zellen für die Quantifizierung und morphometrische Analyse von Synapsen im 3D-Raum rekonstruiert werden.